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Navegação por autor "ITRI, ROSANGELA"
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DONATO, MARESSA
; SAUTER, ISMAEL P.
; CASADEI, BRUNA R.; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S.
.
Ação do azul de metileno associado à luz de emissão vermelha em membrana reconstituída a partir de isolados de membrana de Leishmania amazonensis.
In: BAPTISTA, ALESSANDRA (Ed.); NUNEZ, SILVIA C. (Org.); BAPTISTA, ALESSANDRA (Org.); GARCEZ, AGUINALDO (Org.); SILVA, JULIANA P. (Org.); SILVA, CAMILA R. (Org.); CABRAL, FERNANDA V. (Org.); YOSHIMURA, TANIA M. (Org.); RIBEIRO, MARTHA S. (Org.) FÓRUM ON-LINE DE TECNOLOGIAS DA LUZ NA SAÚDE, 1st,
May 28-30, 2020,
São Paulo, SP.
Abstract...
São Paulo, SP: Universidade Brasil,
2020.
p. 12-12.
Abstract:
INTRODUÇÃO: A leishmaniose é uma importante doença negligenciada
causada por protozoários do gênero Leishmania, que pode ser transmitida pela
picada de flebotomíneos. O tratamento convencional da leishmaniose envolve
o uso de fármacos que promovem efeitos clínicos adversos e resistência ao
tratamento. Assim, o desenvolvimento de novas técnicas para o tratamento
desta doença são cruciais. Recentemente, tem havido um interesse crescente
na aplicação de terapia fotodinâmica (PDT) na leishmaniose cutânea, que tem
mostrado bons resultados e parece ser bem tolerada pelos pacientes.
OBJETIVO: Desenvolver um protocolo para produzir vesículas gigantes de
membrana plasmática (GPMVs) a partir da membrana de promastigotas de
Leishmania amazonensis e verificar os efeitos da PDT mediada por azul de
metileno (AM) em GPMVs de L.amazonensis. METODOLOGIA: A extração da
membrana dos parasitas foi feita por centrifugações com diferentes gradientes
de sacarose. Dosagem de fosfato e proteína foi realizada para confirmar a
extração da membrana. As GPMVs foram então preparadas pela técnica de
eletroformação usando diferentes freqüências e tensões. As GPMVs
reconstituídas foram observadas em microscópio óptico invertido em contraste
de fase. Na sequência, as GPMVs foram diluídas em solução de glicose 0,2 M
contendo AM para uma concentração final de 50 μM. Em seguida, foram
acondicionadas em uma câmara de observação e levadas ao microscópio.A
irradiação foi feita com a lâmpada de mercúrio de 103 W do microscópio,
usando um filtro apropriado para a fotoativação do AM (lexc= 665 nm).
RESULTADOS: Foi observada perda de contraste da GPMV depois de 210 s
de exposição à luz devido à troca de solução interna (sacarose) e externa
(glicose), indicando formação de poros na vesícula. CONCLUSÃO: Nós fomos
capazes de desenvolver um protocolo para formação de GPMVs de L.
amazonensis, que mostraram poros após PDT, sugerindo alterações na
permeabilidade da membrana.
Palavras-Chave:
protozoa;
parasites;
photosensitivity;
therapy;
radiations;
optical microscopy
DONATO, MARESSA; SAUTER, ISMAEL P.; CASADEI, BRUNA R.; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S.
Ação do azul de metileno associado à luz de emissão vermelha em membrana reconstituída a partir de isolados de membrana de Leishmania amazonensis.
In:
BAPTISTA, ALESSANDRA (ed.); NUNEZ, SILVIA C. (org.); BAPTISTA, ALESSANDRA (org.); GARCEZ, AGUINALDO (org.); SILVA, JULIANA P. (org.); SILVA, CAMILA R. (org.); CABRAL, FERNANDA V. (org.); YOSHIMURA, TANIA M. (org.); RIBEIRO, MARTHA S. (org.) FÓRUM ON-LINE DE TECNOLOGIAS DA LUZ NA SAÚDE, 1st,
May 28-30, 2020,
São Paulo, SP.
Abstract...
São Paulo, SP: Universidade Brasil,
2020.
p. 12-12.
Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/31540. Acesso em: $DATA.
Esta referência é gerada automaticamente de acordo com as normas do estilo IPEN/SP (ABNT NBR 6023) e recomenda-se uma verificação final e ajustes caso necessário.
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-
GARCEZ, AGUINALDO S.; NUNEZ, SILVIA C.; BAPTISTA, MAURICIO S.; DAGHASTANLI, NASSER A.; ITRI, ROSANGELA; HAMBLIN, MICHAEL R.; RIBEIRO, MARTHA S.
.
Antimicrobial mechanisms behing photodynamic effect in the presence of hydrogen peroxide.
Photochemical and Photobiological Sciences,
v. 10,
n. 4,
p. 483-490,
2011.
Palavras-Chave:
therapy;
methylene blue;
antimicrobial agents;
hydrogen peroxide;
fluorescence;
microscopy;
photosensitivity
GARCEZ, AGUINALDO S.; NUNEZ, SILVIA C.; BAPTISTA, MAURICIO S.; DAGHASTANLI, NASSER A.; ITRI, ROSANGELA; HAMBLIN, MICHAEL R.; RIBEIRO, MARTHA S.
Antimicrobial mechanisms behing photodynamic effect in the presence of hydrogen peroxide.
Photochemical and Photobiological Sciences,
v. 10,
n. 4,
p. 483-490,
2011.
Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/5613. Acesso em: $DATA.
Esta referência é gerada automaticamente de acordo com as normas do estilo IPEN/SP (ABNT NBR 6023) e recomenda-se uma verificação final e ajustes caso necessário.
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DONATO, MARESSA; ALVAREZ, CARLOS; RIBEIRO, MARTHA S.
; ITRI, ROSANGELA.
Effects of Pore-forming toxins (PFTs) on oxidized model membranes represented by Giant Unilamellar Vesicles (GUVs).
In: CONGRESSO DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOFISICA, 43.,
27-30 de setembro, 2018,
Santos, SP.
Resumo...
Rio de Janeiro: Sociedade Brasileira de Biofísica,
2018.
p. 79-79.
Abstract:
Sticholysin I (St1) and II (St2) are polypeptides isolated
from the Caribbean sea anemone Stichodactyla
Helianthus, with a molecular mass of 19401 and
19290 Da, with hemolytic and pore-forming properties
in membranes (LANIO et al., 2000). It has been
previously determined that the activity of membrane
pore formation is related to the N-terminal insertion
in the bilayer and lipid phase coexistence must play a
role too (ROS et al., 2013). As PFTs, both toxins are
considered to have potential appliance in parasitic
and tumor diseases (MARTÍNEZ et al., 2007). In this
work, we have investigated GUVs composed of nonoxidized
POPC and POPC hydroperoxide (POPC-OOH)
interacting with ST1 and ST2 by optical microscopy.
The results did not reveal a significant PFT-membrane
interaction such that no membrane destabilization
was observed over incubation time of 20 min. On the
other hand, when GUVs were made of mixtures of
POPC or POPC-OOH and Sphingomyellin (SM), optical
contrast fading was noticed indicating an increase in
lipid bilayer permeability due to pore formation. Of
note, neither micron-sized pores were observed nor
membrane disruption. Further, the results also pointed
out vesicles composed of oxidized lipids and SM have
a much faster pore forming capacity. Therefore, our
results thus suggest that membranes containing -OOH
and SM promote the insertion of toxins due to their
great fluidity, facilitating the insertion of the TFPs and
their differentiation, leading to the formation of pores.
DONATO, MARESSA; ALVAREZ, CARLOS; RIBEIRO, MARTHA S.; ITRI, ROSANGELA.
Effects of Pore-forming toxins (PFTs) on oxidized model membranes represented by Giant Unilamellar Vesicles (GUVs).
In:
CONGRESSO DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOFISICA, 43.,
27-30 de setembro, 2018,
Santos, SP.
Resumo...
Rio de Janeiro: Sociedade Brasileira de Biofísica,
2018.
p. 79-79.
Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/29725. Acesso em: $DATA.
Esta referência é gerada automaticamente de acordo com as normas do estilo IPEN/SP (ABNT NBR 6023) e recomenda-se uma verificação final e ajustes caso necessário.
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SOUZA, MARESSA D.F. de
; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S.
.
Reconstitution of Leishmania plasma membrane to understand the photodynamic effect.
Biophysical Reviews,
v. 13,
n. 6,
p. 1384-1384,
2021.
DOI:
10.1007/s12551-021-00845-2
Abstract:
INTRODUCTION
Leishmaniasis is an important neglected disease. Photodynamic therapy
(PDT) has been used to fight cutaneous leishmaniasis showing good
results. However, PDT mechanisms in Leishmania parasites are not yet
completely clarified.
OBJECTIVES
In this work, our objective was to develop a protocol to produce giant
plasma membrane vesicles (GPMVs) from Leishmania amazonensis
promastigotes to understand the mechanisms of action of methylene blue
(MB)-mediated PDT on the cell membrane of parasites.
MATERIALS AND METHODS
For membrane extraction, several techniques were tested. The osmotic
shock was the technique that presented the best yield and effectiveness.
Phosphate and protein measurements were performed to confirm membrane
extraction. For the growth of GPMVs, the best technique was
electroforming using different frequencies and voltages in 4 cycles.
Reconstituted GPMVs were observed by phase-contrast light microscopy.
Subsequently, PDT was applied to GPMVs dispersed in an aqueous
solution containing 50 μM MB and we verified the changes in permeability
before and after exposure to light. The same processwas applied to
giant unilamellar vesicles (GUVs) with lipid compositions similar to the
parasite membrane.
DISCUSSION AND RESULTS
The electroforming technique with the protocol developed in this work
made it possible to obtain GPMVs froma promastigote membrane isolate
of L. amazonensis. The membrane isolation technique was effective to
extract the parasite's membrane while preserving lipids and proteins. In
GUVs we observe an increase in the area during PDT in different compositions
and loss of contrast. The GPMVs showed a loss of contrast as
well as the GUVs but did not show an increase in area.
CONCLUSION
This factor could be explained by the high degree of complexity of the
membrane, which contains membrane proteins in addition to containing
lipids.
SOUZA, MARESSA D.F. de; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S.
Reconstitution of Leishmania plasma membrane to understand the photodynamic effect.
Biophysical Reviews,
v. 13,
n. 6,
p. 1384-1384,
2021.
DOI:
10.1007/s12551-021-00845-2.
Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/32887. Acesso em: $DATA.
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SOUZA, MARESSA D.F. de
; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S.
.
Reconstitution of Leishmania plasma membrane to understand the photodynamic effect.
In: CONGRESS OF THE INTERNATIONAL UNION FOR PURE APPLIED BIOPHYSICS, 20th; ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN SOCIETY FOR BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY, 50th; CONGRESS OF BRAZILIAN BIOPHYSICS SOCIETY, 45th; BRAZILIAN SOCIETY ON NUCLEAR BIOSCIENCES CONGRESS, 13th,
October 4-8, 2021,
São Paulo, SP.
Abstract...
São Paulo, SP: Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular (SBBq),
2021.
p. 255-255.
Abstract:
Leishmaniasis is an important neglected disease. Photodynamic therapy (PDT) has been used to fight cutaneous
leishmaniasis showing good results. However, PDT mechanisms in Leishmania parasites are not yet completely
clarified. In this work, our objective was to develop a protocol to produce giant plasma membrane vesicles (GPMVs)
from Leishmania amazonensis promastigotes to understand the mechanisms of action of methylene blue (MB)-
mediated PDT on the cell membrane of parasites. For membrane extraction, several techniques were tested. The
osmotic shock was the technique that presented the best yield and effectiveness. Phosphate and protein
measurements were performed to confirm membrane extraction. For the growth of GPMVs, the best technique was
electroforming using different frequencies and voltages in 4 cycles. Reconstituted GPMVs were observed by phasecontrast
light microscopy. Subsequently, PDT was applied to GPMVs dispersed in an aqueous solution containing
50 μM MB and we verified the changes in permeability before and after exposure to light. The same process was
applied to giant unilamellar vesicles (GUVs) with lipid compositions similar to the parasite membrane. The
electroforming technique with the protocol developed in this work made it possible to obtain GPMVs from a
promastigote membrane isolate of L. amazonensis. The membrane isolation technique was effective to extract the
parasite's membrane while preserving lipids and proteins. In GUVs we observe an increase in the area during PDT
in different compositions and loss of contrast. The GPMVs showed a loss of contrast as well as the GUVs but did not
show an increase in area. This factor could be explained by the high degree of complexity of the membrane, which
contains membrane proteins in addition to containing lipids.
Palavras-Chave:
therapy;
photodynamic therapy;
protozoa;
parasitic diseases;
cell membranes
SOUZA, MARESSA D.F. de; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S.
Reconstitution of Leishmania plasma membrane to understand the photodynamic effect.
In:
CONGRESS OF THE INTERNATIONAL UNION FOR PURE APPLIED BIOPHYSICS, 20th; ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN SOCIETY FOR BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY, 50th; CONGRESS OF BRAZILIAN BIOPHYSICS SOCIETY, 45th; BRAZILIAN SOCIETY ON NUCLEAR BIOSCIENCES CONGRESS, 13th,
October 4-8, 2021,
São Paulo, SP.
Abstract...
São Paulo, SP: Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular (SBBq),
2021.
p. 255-255.
Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/32871. Acesso em: $DATA.
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COME, BENEDETTA; DONATO, MARESSA
; POTENZA, LUCIA F.; MARIANI, PAOLO; ITRI, ROSANGELA; SPINOZZI, FRANCESCO.
The intriguing role of rhamnolipids on plasma membrane remodelling: from lipid rafts to membrane budding.
Journal of Colloid and Interface Science,
v. 582,
n. Part B,
p. 669-677,
2021.
DOI:
10.1016/j.jcis.2020.08.027
Abstract:
Rhamnolipids (RLs) comprise a class of glycolipids produced by Pseudomonas aeruginosa under appropriate
culture medium. They act as biosurfactants being composed by a hydrophilic head of either one
(mono-RL) or two (di-RL) rhamnose moieties coupled to hydroxyaliphatic chains. It is well accepted that
RLs present low biolitic activity as compared to other synthetic surfactants. However, their mechanisms
of action in biological systems are not well defined yet. The interaction of RLs with lipid bilayers are here
investigated to address how they impact on plasma membrane at molecular level. Our experimental
approach was based on a deep analysis of optical microscopy data from giant unilamellar vesicles
(GUVs) dispersed in aqueous solutions containing up to 0.5 mM of commercially available RLs (a mixture
of mono-RL, 33–37 mol%, and di-RL, 63–67 mol%, cmc of 0:068 ± 0:005 mM). GUVs were made up of a
single lipid POPC and a ternary system containing DOPC, sphingomyelin and cholesterol, which mimic
lipid raft platforms. Our results demonstrate that RLs have a low partition in the lipid bilayer in respect
to the total molecules in solution. We suppose that RLs insert in the outer leaflet with low propensity to
flip-flop. In the case of POPC GUVs, the insertion of RL molecules in the outer leaflet impairs changes in
spontaneous membrane curvature with incubation time. Then, small buds are formed that remain linked
to the original membrane. No changes in membrane permeability have been detected. A remarkable
result refers to the insertion of RLs in membranes containing liquid ordered (Lo) - liquid disordered
(Ld) phase coexistence. The rate of interaction has been observed to be higher for Ld phase than for Lo
phase (0:12 . 10-6 s-1 and 0:023 . 10-6 s-1 for Ld and Lo, respectively, at RL concentration of 0.5 mM).
As a consequence, the preferential RL insertion in Ld phase may also alter the membrane spontaneous curvature which, coupled to the change in the line tension associated to the domains boundary, conducted
to Lo domain protrusion. Even if it has been observed on a model system, such membrane remodelling
might correlate to endocytic processes activated in cell membranes, regardless of the participation
of specific proteins. Further, changes imposed by RLs in lipid rafts may affect the association of key proteins
enrolled in cell signaling, which may perturb cell homeostasis.
Palavras-Chave:
membranes;
lipids;
cell membranes;
microorganisms;
plasma;
pseudomonas;
surfactants
COME, BENEDETTA; DONATO, MARESSA; POTENZA, LUCIA F.; MARIANI, PAOLO; ITRI, ROSANGELA; SPINOZZI, FRANCESCO.
The intriguing role of rhamnolipids on plasma membrane remodelling: from lipid rafts to membrane budding.
Journal of Colloid and Interface Science,
v. 582,
n. Part B,
p. 669-677,
2021.
DOI:
10.1016/j.jcis.2020.08.027.
Disponível em: http://200.136.52.105/handle/123456789/31623. Acesso em: $DATA.
Esta referência é gerada automaticamente de acordo com as normas do estilo IPEN/SP (ABNT NBR 6023) e recomenda-se uma verificação final e ajustes caso necessário.
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DONATO, MARESSA
; SOTO, CARMEN; LANIO, MARIA E.; ITRI, ROSANGELA; ALVAREZ, CARLOS.
The pore-forming activity of sticholysin I is enhanced by the presence of a phospholipid hydroperoxide in membrane.
Toxicon,
v. 204,
p. 44-55,
2021.
DOI:
10.1016/j.toxicon.2021.10.012
Abstract:
Sticholysin I (StI) is a pore-forming toxin (PFT) belonging to the actinoporin protein family characterized by high permeabilizing activity in membranes. StI readily associates with sphingomyelin (SM)-containing membranes originating pores that can lead to cell death. Binding and pore-formation are critically dependent on the physicochemical properties of membrane. 1-palmitoyl-2-oleoylphosphatidylcholine hydroperoxide (POPC–OOH) is an oxidized phospholipid (OxPL) containing an –OOH moiety in the unsaturated hydrocarbon chain which orientates towards the bilayer interface. This orientation causes an increase in the lipid molecular area, lateral expansion and decrease in bilayer thickness, elastic and bending modulus, as well as modification of lipid packing. Taking advantage of membrane structural changes promoted by POPC-OOH, we investigated its influence on the permeabilizing ability of StI. Here we report the action of StI on Giant Unilamellar Vesicles (GUVs) made of 1-palmitoyl-2-oleoylphosphatidylcholine (POPC) and SM containing increasing amount of POPC-OOH to assess vesicle permeability changes when compared to OxPL-lacking membranes. Inclusion of POPC-OOH in membranes did not promote spontaneous vesicle leaking but resulted in increased membrane permeability due to StI action. StI activity did not modify the fluid-gel phase coexistence boundaries neither in POPC:SM or POPC-OOH:SM membranes. However, the StI insertion mechanism in membrane seems to differ between POPC:SM and POPC-OOH:SM mixtures as suggested by changes in the time course of monolayer surface tension measurements, even though a preferable binding of the toxin to OxPL-containing systems could not be here demonstrated. In summary, modifications in the membrane imposed by lipid hydroperoxidation favor StI permeabilizing activity.
Palavras-Chave:
phospholipids;
hydrogen peroxide;
cell membranes;
antimitotic drugs;
toxins;
phase transformations
DONATO, MARESSA; SOTO, CARMEN; LANIO, MARIA E.; ITRI, ROSANGELA; ALVAREZ, CARLOS.
The pore-forming activity of sticholysin I is enhanced by the presence of a phospholipid hydroperoxide in membrane.
Toxicon,
v. 204,
p. 44-55,
2021.
DOI:
10.1016/j.toxicon.2021.10.012.
Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/32397. Acesso em: $DATA.
Esta referência é gerada automaticamente de acordo com as normas do estilo IPEN/SP (ABNT NBR 6023) e recomenda-se uma verificação final e ajustes caso necessário.
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O gerenciamento do Repositório está a cargo da Biblioteca do IPEN. Constam neste RI, até o presente momento 20.950 itens que tanto podem ser artigos de periódicos ou de eventos nacionais e internacionais, dissertações e teses, livros, capítulo de livros e relatórios técnicos. Para participar do RI-IPEN é necessário que pelo menos um dos autores tenha vínculo acadêmico ou funcional com o Instituto. Nesta primeira etapa de funcionamento do RI, a coleta das publicações é realizada periodicamente pela equipe da Biblioteca do IPEN, extraindo os dados das bases internacionais tais como a Web of Science, Scopus, INIS, SciElo além de verificar o Currículo Lattes. O RI-IPEN apresenta também um aspecto inovador no seu funcionamento. Por meio de metadados específicos ele está vinculado ao sistema de gerenciamento das atividades do Plano Diretor anual do IPEN (SIGEPI). Com o objetivo de fornecer dados numéricos para a elaboração dos indicadores da Produção Cientifica Institucional, disponibiliza uma tabela estatística registrando em tempo real a inserção de novos itens. Foi criado um metadado que contém um número único para cada integrante da comunidade científica do IPEN. Esse metadado se transformou em um filtro que ao ser acionado apresenta todos os trabalhos de um determinado autor independente das variáveis na forma de citação do seu nome.
A elaboração do projeto do RI do IPEN foi iniciado em novembro de 2013, colocado em operação interna em julho de 2014 e disponibilizado na Internet em junho de 2015. Utiliza o software livre Dspace, desenvolvido pelo Massachusetts Institute of Technology (MIT). Para descrição dos metadados adota o padrão Dublin Core. É compatível com o Protocolo de Arquivos Abertos (OAI) permitindo interoperabilidade com repositórios de âmbito nacional e internacional.
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2. A experiência do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN-CNEN/SP) na criação de um Repositório Digital Institucional – RDI,
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O Repositório Digital do IPEN é um equipamento institucional de acesso aberto, criado com o objetivo de reunir, preservar, disponibilizar e conferir maior visibilidade à Produção Científica publicada pelo Instituto, desde sua criação em 1956.
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A elaboração do projeto do RI do IPEN foi iniciado em novembro de 2013, colocado em operação interna em julho de 2014 e disponibilizado na Internet em junho de 2015. Utiliza o software livre Dspace, desenvolvido pelo Massachusetts Institute of Technology (MIT). Para descrição dos metadados adota o padrão Dublin Core. É compatível com o Protocolo de Arquivos Abertos (OAI) permitindo interoperabilidade com repositórios de âmbito nacional e internacional.
O gerenciamento do Repositório está a cargo da Biblioteca do IPEN. Constam neste RI, até o presente momento 20.950 itens que tanto podem ser artigos de periódicos ou de eventos nacionais e internacionais, dissertações e teses, livros, capítulo de livros e relatórios técnicos. Para participar do RI-IPEN é necessário que pelo menos um dos autores tenha vínculo acadêmico ou funcional com o Instituto. Nesta primeira etapa de funcionamento do RI, a coleta das publicações é realizada periodicamente pela equipe da Biblioteca do IPEN, extraindo os dados das bases internacionais tais como a Web of Science, Scopus, INIS, SciElo além de verificar o Currículo Lattes. O RI-IPEN apresenta também um aspecto inovador no seu funcionamento. Por meio de metadados específicos ele está vinculado ao sistema de gerenciamento das atividades do Plano Diretor anual do IPEN (SIGEPI). Com o objetivo de fornecer dados numéricos para a elaboração dos indicadores da Produção Cientifica Institucional, disponibiliza uma tabela estatística registrando em tempo real a inserção de novos itens. Foi criado um metadado que contém um número único para cada integrante da comunidade científica do IPEN. Esse metadado se transformou em um filtro que ao ser acionado apresenta todos os trabalhos de um determinado autor independente das variáveis na forma de citação do seu nome.