Abstract: O carcinoma de células renais (CCR) representa 3% das neoplasias humanas e aproximadamente 90% das neoplasias renais e entre os tumores urológicos. O CCR é bastante resistente à radioterapia convencional. Entretanto, com o aparecimento de novas técnicas/equipamentos é possivel a aplicação de doses com precisão presevando-se os tecidos adjacentes. Para a verificação da expressão proteica em diferentes tecidos e fluidos corporais, foi utilizado o estudo proteômico sob diferentes condições e / ou tempos. A espectrometria de massa permite a identificação e quantificação de milhares de proteínas e peptídeos em fluidos biológicos ou células lisadas, sendo assim uma ferramenta poderosa para identificação de potenciais biomarcadores de doenças. A finalidade deste trabalho foi analisar o perfil proteico das células de adenocarcinoma renal (786-0) após a radiação com doses que variaram de 2 a 10 Gy. Os dados foram tratados com o programa One-way ANOVA seguida do de Bonferroni. Pelo ensaio de clonogenicidade definiou-se a dose de 8 Gy como a ideal estudos. A extração das proteínas citoplasmáticas foi realizada com o kit de extração do proteoma subcelular PE e a quantificação das proteínas feita pelo método de Lowry. A integridade das proteínas foi analisada por SDS-PAGE e a solução proteica foi verificada em LTQ Orbitrap. Os resultados gerados foram analisados pelo servidor MASCOT para a busca de peptídeos. A análise por espectrometria de massa foi possível identificar 44 proteínas nas amostras não irradiadas - e 87 das amostras irradiadas. Nas amostras não irradiadas a distribuição dos grupos funcionais foi de síntese proteica 46,66%; Metabolismo energético 16,66%; Migração e proliferação 16,66%; Antioxidantes 3,33%. No grupo irradiado síntese proteica 35,89%; Metabolismo energético 20,51%; Migração e proliferação 20,51%; Antioxidantes 5,12%; Chaperonas moleculares 5,12% e Endopeptidases 5,12%. Em seguida, analisou-se o espetro de as sequências com escores acima de 40. Nas amostras irradiadas encontrou-se: ENO1 (47 kDa); A VIM (53 kDa)/ HEL113; PSMA1; TRAJ56; hCG; Cofilina-1 (19 kDa); HIST1H4H; PKM2; ANXA1; HSPB1/ HSP27. Deste grupo, entendemos que a subunidade alfa do proteassoma - tipo 1 (PSMA1), que possui uma atividade molecular de endopeptidase, seja um alvo interessante para estudos posteriores.

Palavras-Chave: carcinomas; neoplasms; kidneys; urogenital system diseases; gene recombination proteins; animal cells; cell cultures; ionizing radiations; mass spectroscopy; radiation dose units; biological radiation effects

SILVA, EVELIN C.da. Análise do perfil de expressão proteica da linhagem celular humana de adenocarcinoma renal, 786-O, submetida à radiação ionizante. Orientador: Maria Helena Bellini Marumo. 2018. 52 f. Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) - Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP, São Paulo. DOI: 10.11606/D.85.2019.tde-10092019-115524. Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/30174. Acesso em: $DATA.

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Abstract: O Hospital de Referência de Porto Nacional no estado do Tocantins é responsável pelo atendimento da população desta cidade e de mais treze municípios circunvizinhos que compreendem a Regional de Saúde Amor Perfeito pela SESAU TO. Totalizando aproximadamente 180.000 habitantes, grande parte dessa população reside na zonal rural e mesmo os habitantes das zonas urbanas frequentam ambientes selvagens como beira de rios e matas, o que os expõe ao contato com animais peçonhentos. Os acidentes ofídicos ocorridos nesta região são atendidos, quase que exclusivamente, nesta unidade hospitalar e a disfunção renal é uma das mais temíveis complicações nesses casos. Esse estudo epidemiológico visa realizar diagnóstico de disfunção renal em pacientes vítimas de acidente ofídico, e acompanhamento evolutivo do quadro clínico pela mensuração do clearance de creatinina com o método indireto utilizando a Fórmula de Cockroft e Gault. Foi realizado o acompanhamento clínico de todos os pacientes atendidos no Hospital de Referência de Porto Nacional vítimas de acidente ofídico de qualquer gênero no período de janeiro de 2013 a dezembro de 2014. A mensuração do clearance de creatinina foi realizada no momento do primeiro atendimento e posteriormente em acompanhamento diário da Taxa de Filtração Glomerular usando a Fórmula de Cockroft e Gault (140-Peso-kg) x Idade em anos / 72 x creatinina plasmática. Durante o período estudado foram atendidos neste hospital 78 casos de acidente ofídico, dos quais 88,4% classificados como acidente Botrópico e 6,4% como Crotálico. O clearance de creatinina ficou abaixo de 60 ml/min/m², o que comprova disfunção renal, em 12 pacientes, demonstrando uma incidência geral de 15,4%. A incidência de acidente Botrópico foi de 15,9 % enquanto que a do tipo Crotálico foi de 20%. Todos os pacientes restabeleceram a função renal normal após término do tratamento. A maioria dos casos ocorreu nos meses de janeiro, fevereiro, novembro e dezembro, onde ocorrem as maiores incidências de chuvas. Fatores como idade do paciente e o tempo entre o acidente e o início da terapia específica, com soro adequado, contribuíram para o surgimento da Insuficiência Renal Aguda pós-acidente ofídico. O conhecimento do perfil epidemiológico de cada região aliado ao estudo das taxas de incidência, prevalência e complicações desta entidade clínica, bem como o início precoce da terapêutica adequada interferem no surgimento de lesões renais com pior prognóstico.

Palavras-Chave: snakes; venoms; toxins; kidneys; failures; immune serums; epidemiology; equations; comparative evaluations; brazil

MAGALHAES FILHO, ASTERIO S. Avaliação da função renal pelo Clearance de Creatinina, dos pacientes vítimas de acidente ofídico no Hospital de Referência de Porto Nacional Tocantins (2013-2014). Orientador: Nanci do Nascimento. 2015. 86 f. Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) - Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP, São Paulo. DOI: 10.11606/D.85.2016.tde-18022016-085103. Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/26085. Acesso em: $DATA.

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Abstract: Os venenos das serpentes são compostos protéicos complexos com extensas atividades biológicas. Estas moléculas abrangem até 95% do peso seco do veneno, e compreendem enzimas, toxinas não enzimáticas e proteínas atóxicas. Dentre as complicações fisiológicas, a Insuficiência Renal Aguda - IRA é bem comum nos acidentes crotálicos, onde as concentrações renais do veneno se apresentam até 50% maiores do que na concentração plasmática. A fração tóxica responsável por essa complicação é a crotoxina. O veneno das serpentes, quando irradiado com raios gama de 60Co, tem a sua toxicidade diminuída, entretanto, são mantidas as suas propriedades imunológicas. Nossa hipótese é que a utilização de veneno irradiado em substituição ao nativo pode reduzir a taxa de lesões renais em animais de grande porte durante a produção de soros antiofídicos, propiciando melhor qualidade de vida e bem estar desses animais. No presente estudo realizou-se o isolamento da crotoxina por técnicas cromatográficas, a partir do veneno da serpente Crotalus durissus terrificus. Parte da toxina isolada foi reservada e denominada crotoxina nativa (CTXN) enquanto que outra parte foi irradiada com 2 kGy de raios gama oriundos de uma fonte de 60Co e denominada crotoxina irradiada (CTXI). Diferentes grupos de camundongos Balb/c receberam a toxina nativa ou irradiada e tiveram seus rins removidos em diferentes tempos pós-injeção da crotoxina. Realizou-se a nefrectomia dos animais e foi feito o preparo dos cortes histológicos em Hematoxilina-Eosina (HE) e cortes de imunohistoquímica com anticorpo policlonal de coelho anticrotoxina. As alterações histopatológicas encontradas nas amostras foram glomerulonefrite (GN), congestão capilar (CC) e necrose tubular aguda (NTA). Verificou-se que a GN teve maior ocorrência no grupo CTXN que no grupo CTXI. A NTA foi dominante no grupo CTXN em relação ao grupo CTXI. A CC foi predominante no grupo CTXI que no grupo CTXN. Entretanto esta diferença não é estatisticamente significante segundo o teste t Student de amostras independentes. O tratamento imunohistoquímico revelou que a concentração de antígeno marcado com o anticorpo é decrescente segundo os intervalos de tempo de eutanásia dos animais do grupo inoculado com CTXI, pois a crotoxina quando irradiada tem a sua excreção renal facilitada. Conclui-se que as alterações histopatológicas GN e a NTA foram significativamente menos frequentes em rins de animais inoculados com CTXI. Diferentemente da crotoxina nativa, a crotoxina irradiada é detectada pelo anticorpo anticrotoxina apenas nos tempos intermediários pós-inoculação e em baixa concentração, indicando que a radiação gama promoveu mudanças na forma de ligação da toxina ao tecido renal, facilitando sua eliminação e diminuindo, portanto, as chances de lesão. Esses resultados reforçam as evidências de que o uso de veneno irradiado no processo de imunização garante uma melhor qualidade de vida e bem estar aos animais soroprodutores.

Palavras-Chave: snakes; venoms; toxins; kidneys; failures; biological effects; mice; gamma radiation; cobalt 60; comparative evaluations

ROCHA, ANDRE M. Comparação entre a nefrotoxicidade da crotoxina nativa e a irradiada com raios gama de Co-60 em camundongos. Orientador: Nanci do Nascimento. 2016. 68 f. Dissertação (Mestrado em Tecnologia Nuclear) - Instituto de Pesquisas Energeticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP, São Paulo. DOI: 10.11606/D.85.2016.tde-03032016-091711. Disponível em: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/26084. Acesso em: $DATA.

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