Navegação Eventos - Resumos por autor "ITRI, ROSANGELA"

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  • IPEN-DOC 27312

    DONATO, MARESSA ; SAUTER, ISMAEL P. ; CASADEI, BRUNA R.; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S. . Ação do azul de metileno associado à luz de emissão vermelha em membrana reconstituída a partir de isolados de membrana de Leishmania amazonensis. In: BAPTISTA, ALESSANDRA (Ed.); NUNEZ, SILVIA C. (Org.); BAPTISTA, ALESSANDRA (Org.); GARCEZ, AGUINALDO (Org.); SILVA, JULIANA P. (Org.); SILVA, CAMILA R. (Org.); CABRAL, FERNANDA V. (Org.); YOSHIMURA, TANIA M. (Org.); RIBEIRO, MARTHA S. (Org.) FÓRUM ON-LINE DE TECNOLOGIAS DA LUZ NA SAÚDE, 1st, May 28-30, 2020, São Paulo, SP. Abstract... São Paulo, SP: Universidade Brasil, 2020. p. 12-12.

    Abstract: INTRODUÇÃO: A leishmaniose é uma importante doença negligenciada causada por protozoários do gênero Leishmania, que pode ser transmitida pela picada de flebotomíneos. O tratamento convencional da leishmaniose envolve o uso de fármacos que promovem efeitos clínicos adversos e resistência ao tratamento. Assim, o desenvolvimento de novas técnicas para o tratamento desta doença são cruciais. Recentemente, tem havido um interesse crescente na aplicação de terapia fotodinâmica (PDT) na leishmaniose cutânea, que tem mostrado bons resultados e parece ser bem tolerada pelos pacientes. OBJETIVO: Desenvolver um protocolo para produzir vesículas gigantes de membrana plasmática (GPMVs) a partir da membrana de promastigotas de Leishmania amazonensis e verificar os efeitos da PDT mediada por azul de metileno (AM) em GPMVs de L.amazonensis. METODOLOGIA: A extração da membrana dos parasitas foi feita por centrifugações com diferentes gradientes de sacarose. Dosagem de fosfato e proteína foi realizada para confirmar a extração da membrana. As GPMVs foram então preparadas pela técnica de eletroformação usando diferentes freqüências e tensões. As GPMVs reconstituídas foram observadas em microscópio óptico invertido em contraste de fase. Na sequência, as GPMVs foram diluídas em solução de glicose 0,2 M contendo AM para uma concentração final de 50 μM. Em seguida, foram acondicionadas em uma câmara de observação e levadas ao microscópio.A irradiação foi feita com a lâmpada de mercúrio de 103 W do microscópio, usando um filtro apropriado para a fotoativação do AM (lexc= 665 nm). RESULTADOS: Foi observada perda de contraste da GPMV depois de 210 s de exposição à luz devido à troca de solução interna (sacarose) e externa (glicose), indicando formação de poros na vesícula. CONCLUSÃO: Nós fomos capazes de desenvolver um protocolo para formação de GPMVs de L. amazonensis, que mostraram poros após PDT, sugerindo alterações na permeabilidade da membrana.

    Palavras-Chave: protozoa; parasites; photosensitivity; therapy; radiations; optical microscopy

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  • IPEN-DOC 25552

    DONATO, MARESSA; ALVAREZ, CARLOS; RIBEIRO, MARTHA S. ; ITRI, ROSANGELA. Effects of Pore-forming toxins (PFTs) on oxidized model membranes represented by Giant Unilamellar Vesicles (GUVs). In: CONGRESSO DA SOCIEDADE BRASILEIRA DE BIOFISICA, 43., 27-30 de setembro, 2018, Santos, SP. Resumo... Rio de Janeiro: Sociedade Brasileira de Biofísica, 2018. p. 79-79.

    Abstract: Sticholysin I (St1) and II (St2) are polypeptides isolated from the Caribbean sea anemone Stichodactyla Helianthus, with a molecular mass of 19401 and 19290 Da, with hemolytic and pore-forming properties in membranes (LANIO et al., 2000). It has been previously determined that the activity of membrane pore formation is related to the N-terminal insertion in the bilayer and lipid phase coexistence must play a role too (ROS et al., 2013). As PFTs, both toxins are considered to have potential appliance in parasitic and tumor diseases (MARTÍNEZ et al., 2007). In this work, we have investigated GUVs composed of nonoxidized POPC and POPC hydroperoxide (POPC-OOH) interacting with ST1 and ST2 by optical microscopy. The results did not reveal a significant PFT-membrane interaction such that no membrane destabilization was observed over incubation time of 20 min. On the other hand, when GUVs were made of mixtures of POPC or POPC-OOH and Sphingomyellin (SM), optical contrast fading was noticed indicating an increase in lipid bilayer permeability due to pore formation. Of note, neither micron-sized pores were observed nor membrane disruption. Further, the results also pointed out vesicles composed of oxidized lipids and SM have a much faster pore forming capacity. Therefore, our results thus suggest that membranes containing -OOH and SM promote the insertion of toxins due to their great fluidity, facilitating the insertion of the TFPs and their differentiation, leading to the formation of pores.

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  • IPEN-DOC 28593

    SOUZA, MARESSA D.F. de ; ITRI, ROSANGELA; RIBEIRO, MARTHA S. . Reconstitution of Leishmania plasma membrane to understand the photodynamic effect. In: CONGRESS OF THE INTERNATIONAL UNION FOR PURE APPLIED BIOPHYSICS, 20th; ANNUAL MEETING OF THE BRAZILIAN SOCIETY FOR BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY, 50th; CONGRESS OF BRAZILIAN BIOPHYSICS SOCIETY, 45th; BRAZILIAN SOCIETY ON NUCLEAR BIOSCIENCES CONGRESS, 13th, October 4-8, 2021, São Paulo, SP. Abstract... São Paulo, SP: Sociedade Brasileira de Bioquímica e Biologia Molecular (SBBq), 2021. p. 255-255.

    Abstract: Leishmaniasis is an important neglected disease. Photodynamic therapy (PDT) has been used to fight cutaneous leishmaniasis showing good results. However, PDT mechanisms in Leishmania parasites are not yet completely clarified. In this work, our objective was to develop a protocol to produce giant plasma membrane vesicles (GPMVs) from Leishmania amazonensis promastigotes to understand the mechanisms of action of methylene blue (MB)- mediated PDT on the cell membrane of parasites. For membrane extraction, several techniques were tested. The osmotic shock was the technique that presented the best yield and effectiveness. Phosphate and protein measurements were performed to confirm membrane extraction. For the growth of GPMVs, the best technique was electroforming using different frequencies and voltages in 4 cycles. Reconstituted GPMVs were observed by phasecontrast light microscopy. Subsequently, PDT was applied to GPMVs dispersed in an aqueous solution containing 50 μM MB and we verified the changes in permeability before and after exposure to light. The same process was applied to giant unilamellar vesicles (GUVs) with lipid compositions similar to the parasite membrane. The electroforming technique with the protocol developed in this work made it possible to obtain GPMVs from a promastigote membrane isolate of L. amazonensis. The membrane isolation technique was effective to extract the parasite's membrane while preserving lipids and proteins. In GUVs we observe an increase in the area during PDT in different compositions and loss of contrast. The GPMVs showed a loss of contrast as well as the GUVs but did not show an increase in area. This factor could be explained by the high degree of complexity of the membrane, which contains membrane proteins in addition to containing lipids.

    Palavras-Chave: therapy; photodynamic therapy; protozoa; parasitic diseases; cell membranes

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O gerenciamento do Repositório está a cargo da Biblioteca do IPEN. Constam neste RI, até o presente momento 20.950 itens que tanto podem ser artigos de periódicos ou de eventos nacionais e internacionais, dissertações e teses, livros, capítulo de livros e relatórios técnicos. Para participar do RI-IPEN é necessário que pelo menos um dos autores tenha vínculo acadêmico ou funcional com o Instituto. Nesta primeira etapa de funcionamento do RI, a coleta das publicações é realizada periodicamente pela equipe da Biblioteca do IPEN, extraindo os dados das bases internacionais tais como a Web of Science, Scopus, INIS, SciElo além de verificar o Currículo Lattes. O RI-IPEN apresenta também um aspecto inovador no seu funcionamento. Por meio de metadados específicos ele está vinculado ao sistema de gerenciamento das atividades do Plano Diretor anual do IPEN (SIGEPI). Com o objetivo de fornecer dados numéricos para a elaboração dos indicadores da Produção Cientifica Institucional, disponibiliza uma tabela estatística registrando em tempo real a inserção de novos itens. Foi criado um metadado que contém um número único para cada integrante da comunidade científica do IPEN. Esse metadado se transformou em um filtro que ao ser acionado apresenta todos os trabalhos de um determinado autor independente das variáveis na forma de citação do seu nome.

A elaboração do projeto do RI do IPEN foi iniciado em novembro de 2013, colocado em operação interna em julho de 2014 e disponibilizado na Internet em junho de 2015. Utiliza o software livre Dspace, desenvolvido pelo Massachusetts Institute of Technology (MIT). Para descrição dos metadados adota o padrão Dublin Core. É compatível com o Protocolo de Arquivos Abertos (OAI) permitindo interoperabilidade com repositórios de âmbito nacional e internacional.

1. Portaria IPEN-CNEN/SP nº 387, que estabeleceu os princípios que nortearam a criação do RDI, clique aqui.


2. A experiência do Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares (IPEN-CNEN/SP) na criação de um Repositório Digital Institucional – RDI, clique aqui.

O Repositório Digital do IPEN é um equipamento institucional de acesso aberto, criado com o objetivo de reunir, preservar, disponibilizar e conferir maior visibilidade à Produção Científica publicada pelo Instituto, desde sua criação em 1956.

Operando, inicialmente como uma base de dados referencial o Repositório foi disponibilizado na atual plataforma, em junho de 2015. No Repositório está disponível o acesso ao conteúdo digital de artigos de periódicos, eventos, nacionais e internacionais, livros, capítulos, dissertações, teses e relatórios técnicos.

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